Endotoxines and hemodialysis. Production of sterile pyrogen-free dialysate. Retention of lipopolysaccharides by modified dialysis membranes
Les endotoxines en hémodialyse. Obtention de bains stériles apyrogènes. Rétention des lipopolysaccharides par les membranes de dialyse modifiées
Résumé
The occurence of febrile reactions at the beginning of hemodialysis session has been well correlated with the presence of endotoxines (Lipopolysaccharides, LPS) in the dialysate. We have developed a system for the production of sterile pyrogen-free dialysate using a hemofilter containing polyamide hollow fibers. We have also estimated the molecular weight of LPS by electrophoresis and successive ultrafiltrations using membranes of decreasing pore size. A molecular weight below 5kDa was determined. The dialysis membranes were then modified in order to increase their rejection of LPS. membranes coated with a polycationic organic polymer exhibit high adsorption capacity for LPS. The methods we propose, namely, ultrafiltration of dialysate and coating of dialysis membranes, significantly lower the risks of pyrogenic reactions. However, these results need to be confirmed by clinical experiments.
Les réactions de type hypersensibilité parfois observées au début de séances d'hémodialyse ont été corrélées à la présence, dans les bains de dialyse, d'endotoxines ou lipopolysacharides (LPS) provenant de bactéries de type gram négatif. Nous nous sommes tout d'abord attachés au développement d'un système de production de bains de dialyse stériles et apyrogènes qui soit intégrable au matériel existant. Notre étude nous a permis de rejeter les dispositifs d'ultrafiltration utilisant des membranes organiques planes ou des membranes minérales tubulaires. Nous avons proposé l'emploi d'un hémofiltre à fibres creuses en polyamide qui s'avère un bon compromis puisque, dans des conditions de contamination normales, le bain produit est stérile et apyrogène et la faible perte de charge générée par le filtre permet son intégration aux générateurs de bains existants. Nous avons également déterminé plus précisément la masse moléculaire des LPS par électrophorèse et par filtrations successives sur des membranes de seuils de coupure décroissants. Nous avons ainsi pu mettre en évidence les LPS après filtration sur des membranes de 5 kDa pour les LPS de type R. Dans une dernière étape, nous avons cherché à modifier la membrane de dialyse pour augmenter sa rejection des LPS. Un revêtement de la face dialysat de la membrane par un polymère organique polycationique nous a permis d'obtenir des absorptions notables de LPS. La conjonction des deux méthodes que nous avons proposées, ultrafiltration des bains de transfert des LPS vers le compartiment sanguin. Des essais cliniques nous permettront de valider ce procédé.